Оплодотворение яйцеклеток и культивирование эмбрионов

В ходе пункции врач получает фолликулярную жидкость, в которой должна находиться яйцеклетка. Шприц с фолликулярной жидкостью передается эмбриологу. С этого момента начинается лабораторный эмбриологический этап процедуры ЭКО, который собственно и представляет собой экстракорпоральное оплодотворение яйцеклеток и культивирование эмбрионов.

Эмбриолог вводит фолликулярную жидкость в специальную лабораторную прозрачную чащечку, которая называется «нунка». Содержимое нунки просматривается под микроскопом и определяется, получена яйцеклетка или нет.

Полученные в результате пункции фолликулов яйцеклетки в специальных чашках с питательным раствором помещают в специальный СО2 термостат — инкубатор, где поддерживаются условия, сходные с условиями в материнском организме (в нем темно, точно такая же температура, содержание углекислого газа и прочие параметры).

В инкубаторе яйцеклетки должны адаптироваться к новым для себя условиям в течение нескольких часов. В это время эмбриологи определенным образом подготавливают сперму для инсеминации, обеспечивают капацитацию сперматозоидов (это своеобразный этап окончательного созревания сперматозоидов, который после эякуляции происходит в половых путях женщины; в результате капацитации сперматозоиды преобретают способность к оплодотворению.), проводят обогащение спермы, т.е. отбирают и концентрируют нормальные хорошо подвижные сперматозоиды.

Через 4-6 часов проводится оплодотворение (инсеминация): сперматозоиды в строго определенном количестве осторожно добавляют к каждой яйцеклетке, после чего нунки возвращают в инкубатор. Сперматозоиды сами прикрепляются к оболочке яйцеклетки и выделяют специальный фермент, пытаясь с его помощью проникнуть внутрь. При этом только один из многих тысяч сперматозоидов сможет это сделать и передать свой генетический материал для сотворения новой жизни, то есть оплодотворить яйцеклетку.

Результаты оплодотворения оцениваются на следующее утро. К этому времени должны уже сформироваться зиготы. Если их нет, оплодотворение не произошло. Считается нормальным, если оплодотворяется 60-70% яйцеклеток. В МЦРМ этот показатель уже много лет находится на уровне 75 — 80%. В лабораторных условиях эмбрионы развиваются в течение 48-120 часов. Все это время эмбриологи ведут сложную работу по соответствующему обеспечению каждого этапа культивирования. Она включает в себя «чистку» кумулюса (удаление клеток, окружающих яйцклетку), смену сред и многое другое. Алгоритм действий, технологическое и техническое обеспечение работы эмбриолога строго выверены, как в космических программах, дублированы и поэтому исключают возможность каких-либо ошибок.

Успех лабораторного этапа зависит от многих факторов и прежде всего от качества и количества яйцеклеток и сперматозоидов. Немаловажное значение имеет квалификация и опыт эмбриологов, а также качество расходных материалов (питательных сред, посуды). В этой связи невольно приходит аналогия с приготовлением блюд. Рецепт борща известен всем, его можно найти в любой кулинарной книге, но сварить его вкусным может далеко не каждый. У каждого повара свои секреты.

О лабораторной посуде. Она должна быть сверхчистой. Например, даже одна молекула тяжелого металла может погубить половые клетки или эмбрион. Как-то несколько лет назад к нам обратилось одно питерское предприятие с предложением покупать у них нунки. Они где-то достали хорошую пластмассу, изготовили штампы и оснастку. Процесс пошел. Дали на испытание несколько штук. Мы разделили оставшуюся после анализа порцию спермы на две части. Одну поместили в новую, а другую — в фирменную нунку. На следующий день оказалось, что в тестируемой нунке осталось лишь 3% живых сперматозоидов, а в фирменной 70%. В мире существует всего несколько компаний, производящих качественную лабораторную посуду для ЭКО. Они не разглашают свои технологии. По этой причине все расходные материалы дороги, используются только один раз, мыть или как-то обрабатывать их нельзя, покупать их приходится у дилеров зарубежных фирм.